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粮食、油料检验 淀粉测定法
中国粮油信息网  2010-3-13 16:14:55   来源:本网论坛   【

本标准适用于商品粮食、油料淀粉含量的测定。
    1 仪器和用具 
    1.1 古氏坩埚:25ml;
    1.2 抽滤瓶:500ml; 
    1.3 真空泵或水泵; 
    1.4 滴定管:25ml; 
    1.5 锥形瓶:100ml、250ml、500ml; 
    1.6 移液管:20ml;
    1.7 容量瓶:100ml、250ml、500ml;
    1.8 回流冷凝管;
    1.9 电炉;
    1.10 烧瓶:150ml; 
    1.11 漏斗:6cm; 
    1.12 研钵、温度计、显微镜等。 
    2 试剂 
    2.1 0.5%淀粉酶溶液或麦芽汁:取大麦粒加水湿润浸泡12h,在搪瓷盘内平铺约1cm厚,使其发芽数日。待幼芽长约1cm时,取发芽粒50g,磨碎,加水400ml,在常温下浸渍3h,过滤备用(保存时加氯仿或甲苯数滴,防止生霉); 
    2.2 碘溶液:称碘化钾3.6g, 溶于20ml水中,加碘1.3g,溶解后再加水至100ml;
    2.3 0.1N高锰酸钾标准溶液; 
    2.4 1N氢氧化钠溶液:取氢氧化钠4g加水溶解至100ml;
    2.5 硫酸铁溶液:取硫酸铁50g,加水200ml溶解后,馒慢加入硫酸100ml,冷后加水至1000ml; 
    2.6 3N盐酸: 取盐酸25ml,加水至100ml;
    2.7 6N盐酸:取盐酸100ml,加水至200ml; 
    2.8 20%氢氧化钠溶液; 
    2.9 甲基红指示液:0.1%甲基红乙醇溶液;
    2.10 费林氏溶液: 
    2.10.1 碱性酒石酸铜甲液:取硫酸铜结晶34.69g,加适量水溶解,加硫酸0.5ml,再加水至500ml,用精制石棉过滤; 
    2.10.2 碱性酒石酸铜乙液:取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g,加适量水溶解,稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内; 
    2.11 精制石棉:先用3N盐酸将石棉浸泡2~3日后,用水洗净。再加10%氢氧化钠溶液浸泡2~3日,倾去溶液,用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时,用水洗净。再以3N盐酸浸泡数小时,用水洗至不呈酸性,使之成为微细的软纤维,用水浸泡贮存于玻璃瓶内,作填充古氏坩埚用。 
    3 操作方法
    称试样2~5g,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用乙醚50ml分5次洗除脂肪, 再用85%乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250ml烧杯内,用水约50ml分几次将滤纸上残渣洗入烧杯中,放到沸水浴中加热15min,使淀粉糊化, 放冷至60℃,加淀粉酶溶液(或麦芽汁)20ml,维持 55~60℃水解1h,经常搅拌。然后取1滴加碘液1滴,如显蓝色,再加热糊化,并加淀粉酶溶液(或麦芽汁)20ml,水解至碘液不呈蓝色为止。加热至沸腾,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀。过滤,弃去初滤液,取50ml注入100ml容量瓶中,加6N 盐酸5ml,在68~70℃水浴中加热15min,冷后加甲基红指示液2滴,用20%氢氧化钠溶液中和,加水至刻度,混匀,用以测定还原糖。同时取水50ml和同量的淀粉酶溶液(或麦芽汁)作试剂空白试验。
    4 结果计算 
    淀粉干基含量按下列公式计算:
             5000 × 0.9 (A - B) 
    淀粉(干基%) = ──────────── 
            W × V (100 - M) 
    式中:A-- 转化后测得的还原糖(以葡萄糖计)重量,mg;
       B -- 试剂空白相当于还原糖(以葡萄糖计)重量,mg; 
       V -- 转化后稀释为100ml,测定还原糖的体积,ml; 
       W -- 试样重量,g; 
       M -- 试样水分百分率,%;
        0.9 -- 还原糖(以葡萄糖计)换算为淀粉的因数。 
    双试验结果允许差不超过平均值的1%,取平均值作为测定结果。测定结果取小数点后第一位。 
    注:
    ① 自制淀粉酶: 取已发芽的麦粒,放在25~35℃温度下干燥,磨成粉末。每100g粉末加20%乙醇200ml,浸泡24h后,用细布压榨并过滤, 加双倍滤液量的乙醇进行沉淀。沉 淀经布氏漏斗抽滤后,再置乳钵中与乙醇一起研磨,再抽滤,沉淀用乙醇和乙醚洗涤,最后在硫酸干燥器中干燥后备用。
    ② 试样含脂肪量很少时,可不用乙醚洗涤。
   ③ 在使用淀粉酶前,可用已知含量的淀粉糊溶液少许,加定量的淀粉酶溶液,置55~60℃水浴上加热1h,用碘溶液观察,经水解后蓝色是否减退或消失,以确定酶的活力及水解时所需用量。一般淀粉酶活力为1:25,1:50及1:100。 (问兰)

作者:问兰    来源:本网论坛     编辑:粮信    讨论:[粮油论坛]
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